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主题:微生物论文写作 时间:2024-01-24

纳米粒子应用于微生物检测进展,这篇微生物论文范文为免费优秀学术论文范文,可用于相关写作参考。

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摘 要: 食源性致病菌是引发食源性疾病的主要因素,如何有效地检测出食源性致病菌的存在是食源性疾病预防和控制的关键环节.目前,应用于食源性致病菌检测领域的纳米粒子技术已日益成熟.系统介绍了光学纳米粒子、磁性纳米粒子等技术在微生物致病菌检测中的应用.

关键词: 金纳米粒子; 荧光硅纳米颗粒; 量子点; 上转换荧光纳米粒子; 磁性纳米粒子

中图分类号: TS 207.4文献标志码: A文章编号: 1000 5137(2014)06 0612 06

近几年来,世界范围内的食品安全恶性事故频繁爆发[1],食源性疾病的爆发率大幅上升已引起了世界各地政府的关注,更给世界人民带来了巨大的痛苦和损失.因而,如何快速、灵敏地检测出食源性致病菌的存在已成为控制食品安全问题的关键.传统的食源性疾病的检测方法都要经过分离培养、生化鉴定等步骤,存在操作耗时繁琐、检测灵敏度低和容易出现假阴性等缺点[2],在应对突发性食品安全公共事件上,不能满足快速、准确、灵敏和特异性高等要求.近几十年来,纳米粒子技术在食源性致病菌的检测领域不断发展[3-4].本文作者主要从荧光纳米粒子、磁性纳米粒子等方面介绍了纳米粒子在微生物致病菌快速检测中的应用.

1光学纳米粒子快速检测技术

荧光纳米粒子由于其具有的化学及光学特性,能产生较高的灵敏度,已经被许多课题研究小组用于微生物菌剂的检测[5-6].

1.1金纳米粒子

金纳米粒子是较受欢迎的纳米材料.依赖其独特光学特性,以及在生物液体里的惰性和稳定性使它成为纳米粒子材料诊断中最常用的材料之一.金纳米粒子(AuNPs)广泛被应用于微生物分析、检测和识别领域.通过选择合适的合成方法,可以很容易地形成不同大小和形状的金纳米粒子.AuNPs很容易被硫醇化的DNA探针和蛋白质分子修饰[1](图1),这一特点使它优于其他类型的纳米粒子.金纳米粒子的另一独特特性是呈现出明显的红色,这使诊断测验的敏感性增强,可视性高.此外,金纳米粒子常用于免疫层析试纸条(ICS)生物传感器[7](图2).

ICS已经实现对传染性病原体及毒素的快速、灵敏检测.目标菌和金纳米粒子聚合成红色沉淀,诊断测试中,不需要任何仪器的协助,仍可很容易地看清目标反应,在测试区,检测线为红线,可视化很高[8].同时,金纳米粒子具有较高的消光系数,以及在可见光中具有较宽的吸收光谱,可以克服许多传统荧光素的局限性[9].Zhu研究小组开发了一个混合了金、银2种纳米粒子的局部表面等离子体共振生物传感器,用于金 葡萄球菌肠毒素B检测.这种传感器可直接检测肠毒素B至ng/mL级别,而用于检测肠毒素B的其他表面等离子体共振生物传感器则需要采取扩增的步骤来实现这一目标灵敏度[11].

1.2荧光硅纳米颗粒

荧光检测试验对于微生物学家并不新鲜,因为荧光显微镜和分光荧光计广泛应用于诊断和实验室研究.荧光硅纳米颗粒容易被生物修饰并可通过荧光显微镜或分光荧光计来检测微生物[12].掺杂二氧化硅纳米粒子的染料可以用来探测生物分子,比其他荧光纳米颗粒具有更高的灵敏度[13].

单个荧光二氧化硅纳米粒子可保留数千染料分子,而在免疫荧光测定抗体的直接荧光标记中只有极少数染料分子.因此,利用二氧化硅纳米粒子可以提高检测灵敏度达几百倍.此外,相比于其他荧光纳米粒子,染料中掺杂的二氧化硅纳米颗粒具有光稳定性和增强发光的优点.它们已被广泛地用于生物分子的检测,例如asDNA、抗体、细胞等[14].

二氧化硅纳米粒子可保留有机或者金属染料,该染料可以附着在纳米颗粒的表面或包含在纳米粒子内部.用于成像的纳米颗粒嵌入染料分子后,可免受光的照射,表现出更强的耐光性[15].纳米颗粒可以很容易被抗体或者核酸分子化学功能化和生物修饰化,经化学修饰后的纳米颗粒表面生成的氨基或羧基基团能够使荧光纳米粒子共价连接抗体[16].包被的染料荧光纳米颗粒和抗体结合后,增强了测定的灵敏度,使检出限降低到单个细胞水平[17].这种检测方法对一些苛刻性细菌或者生长比较缓慢的细菌检测非常有利.例如结核杆菌,该菌需要很长的培育时间和特殊的培养条件.Qin研究组曾使用荧光二氧化硅纳米颗粒灵敏地从细菌混合物及标准唾液样品中检测出结核分枝杆菌,结核分枝杆菌结合到A蛋白上,A蛋白被掺杂有二氧化硅纳米粒子的联吡啶钌(RuBpy)修饰[14].另外,在佛罗里达大学的Tan课题研究小组使用荧光二氧化硅纳米颗粒检测单一样品中的多种细菌.该纳米粒子包含不同浓度的染料分子,被同一波长激发后会产生不同的颜色.通过缀合不同细菌对应的抗体的纳米粒子能够检测样品中的3种细菌,每种细菌对应一种颜色[12].

1.3量子点

在过去的20年里,半导体纳米颗粒及量子点的光电子特性以及在生命科学研究中的应用备受研究者的关注,主要应用于生物检测[18].量子点是纳米级的半导体晶体,具有独特的光学特性,作为荧光标记物可用于免疫分析、DNA杂交试验及微生物检测[19].

大部分用于检测细菌的光学生物传感器是基于对有机染料或者蛋白质荧光团荧光排放量的测量.然而,常见的荧光团具有较多的缺点[20](如微弱的耐光性和低强度),且不适用于多种细菌的检测.量子点可以克服这些限制,它们具有光稳定性,且表现出高量子产率[21].通过改变量子点的尺寸和它的化学组成可以使其发射光谱覆盖整个可见光区,故可使用量子点同时检测多个细菌[22].Zhao等使用连接上抗体的量子点和MNPS能够同时检测出鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏杆菌、大肠杆菌O157:H7[23].相比传统有机染料(如异硫氰酸荧光素),量子点可有效提高测定的灵敏度,这一优势通过简单的荧光测定大肠杆菌O157:H7血清型即可表现出才来.Liu研究小组发现了基于流动室微孔免疫滤镜的生物传感器的发展系统,这种传感器以量子点树枝石纳米晶体作为荧光标记[24],可用来捕捉大肠杆菌O157:H7,使用这种生物传感器系统,检测限可低至2.3 CFU/mL.Abdelhamid等使用壳多糖修饰的CdS量子点标记细菌进一步用于生物成像[7].Xu等构建了连接有量子点的免疫层析试纸条,用于快速检测空肠弯曲杆菌,检测限达到104 cfu/mL,是金试纸条检测灵敏度的10倍[25].

结论:大学硕士与本科微生物毕业论文开题报告范文和相关优秀学术职称论文参考文献资料下载,关于免费教你怎么写微生物发酵菌方面论文范文。

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