八角莲中鬼臼毒素含量测定技术,本文是一篇关于鬼臼毒素论文范文，可作为相关选题参考,和写作参考文献。
鬼臼毒素论文参考文献：
【摘 要】目的：建立高效液相色谱法测定八角莲中鬼臼毒素含量的方法.方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsiltm C18柱；流动相：甲醇-0.1mol/L磷酸二氢钾水溶液（50∶50）；流速：1.0ml/min；检测波长：290nm.结果：鬼臼毒素在0.04769～0.4769mg/ml呈良好线性关系（r等于0.9996）,平均回收率为99.94%,RSD等于1.71%（n等于5）.结论：采用高效液相色谱法测定八角莲中鬼臼毒素的含量,操作简便、准确,专属性强.
【关键词】八角莲；鬼臼毒素；含量测定
八角莲为小檗科植物八角莲Dysosma versipellis（Hance.）M. cheng（Podophyllum versipelle Hance.）的根及根茎.具有清热解毒、化痰散结、祛痰消肿之功能.用于痈肿疔疮、瘰疬、咽喉肿痛、跌打损伤、毒蛇咬伤等.笔者曾对八角莲的性状、显微结构进行过研究[1].本实验采用高效液相色谱法测定八角莲中鬼臼毒素的含量,为完善八角莲药材的质量标准及临床应用提供科学依据.
1.仪器和试药
1.1仪器
戴安UltiMateTM3000型高效液相色谱仪,包括四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、变色龙（chromeleon）软件数据处理系统；岛津AUW120D分析天平（d等于0.1mg/0.01mg）；UP5200H超声波清洗器（熊猫集团南京 电子 计量有限公司）.
1.2试药
甲醇为色谱纯（中国上海陆都化学试剂厂）；磷酸二氢钾为分析纯.鬼臼毒素对照品（含量测定用,以93.5%计,批号111645-200301）由中国药品生物制品检定所提供；八角莲Dysosma versipellis（Hance.）M.Cheng（Podophyllum versipelle Hance.）,由中南民族大学万定荣教授鉴定和提供.
2.方法和结果
2.1色谱条件
Diamonsiltm C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）；流动相为甲醇-0.1mol/L磷酸二氢钾（50∶50）；检测波长290nm；流速1.0ml/min；柱温30℃；灵敏度：0.1AUFS；理论塔板数按鬼臼毒素峰计算不低于1500.
2.2对照品溶液的制备
精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥12h的鬼臼毒素对照品适量,加甲醇制成每毫升约含0.5mg的溶液,摇匀,微孔滤膜过滤（0.45μm）,得鬼臼毒素对照品溶液.
2.3供试品溶液的制备
分别取八角莲根茎和根粉末（过3号筛）各约0.5g,精密称取,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,密塞,放置12h,称定重量,超声处理30min,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,微孔滤膜过滤（0.45μm）,得八角莲根茎和根的供试品溶液.
2.4八角莲根茎和根HPLC谱图比较
分别取八角莲根茎和根供试品溶液10μl,注入高效液相色谱仪中,对其HPLC图进行比较,比较可以看出,八角莲根中基本不含鬼臼毒素成分.
2.5线性关系考察
精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥12h的鬼臼毒素对照品25.5mg,置50ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀（0.51×93.5%等于0.4769mg/ml）,精密量取溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,分别置10ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积为纵坐标,鬼臼毒素含量为横坐标,绘制标准曲线,统计学计算回归方程为：Y等于0.01108X+8.6782×10-3,r等于0.9996.结果表明,鬼臼毒素的进样量在0.04769～0.4769mg/ml的范围内,浓度和峰面积呈良好.
2.6精密度实验
精密吸取鬼臼毒素对照品溶液10μl,按上述色谱条件,连续进样5次,依次测定各峰的峰面积值,结果鬼臼毒素对照品RSD等于0.24%,表明仪器精密度良好.
2.7稳定性实验
精密吸取密封室温保存的八角莲根茎供试品溶液10μl,分别于0,2,5,8,10h进样,测定其峰面积值,计算RSD等于0.84%（n等于3）,结果表明,供试品溶液在10h内检测对结果无影响,稳定性良好.
2.8重现性实验
取同一批八角莲根茎样品,按供试品溶液制备方法平行制备5份供试液,分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl,测定5份供试品中鬼臼毒素的含量,结果RSD等于1.50%.
2.9样品测定
取3批八角莲根茎样品,按供试品溶液制备方法操作,分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入高效液相色谱仪,用外标法测定,计算样品中鬼臼毒素的含量.
2.10加样回收率实验
取已知含量的八角莲根茎样品5份,各约0.25g,精密称定,分别加入鬼臼毒素对照品2.55mg（2.55×93.5%等于2.3843mg）,按供试品溶液制备方法操作,照上述色谱条件测定,计算回收率,结果平均回收率为99.94%,RSD等于1.71%.
3.讨论
3.1八角莲中鬼臼毒素的含量和提取方法有关
八角莲的有效成分为鬼臼毒素,有文献报道八角莲经80%甲醇超声提取,测得鬼臼毒素的含量为0.94%,采用文中所用的甲醇超声提取测得鬼臼毒素的含量为1.01%,结果表明,八角莲中鬼臼毒素的含量可能和提取溶剂、方法等有一定关系,值得进一步研究.
3.2八角莲根中基本不含鬼臼毒素
通过比较八角莲根和根茎的HPLC图可以看出,八角莲根中基本不含鬼臼毒素,实验结果表明,主要是八角莲的根茎具有鬼臼毒素的抗癌抗病毒活性.
本法测定八角莲中鬼臼毒素的含量,样品预处理简单,有效成分分离良好,而且无其他成分干扰,对八角莲药材的质量控制有一定的参考价值.
参考文献
[1]陈黎,涂自良,陈吉炎.高效液相色谱法测定八角莲中鬼臼毒素的含量.论文网,2011.08
结论：关于鬼臼毒素方面的论文题目、论文提纲、我用尤脱欣治好了湿尤论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
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