食品添加剂ε—聚赖氨酸发酵培养基优化,这是一篇与食品添加剂论文范文相关的免费优秀学术论文范文资料,为你的论文写作提供参考。
食品添加剂论文参考文献：
ε-聚赖氨酸（ε-PL）是一种由25-30个L-赖氨酸残基通过α-羧基和ε-氨基连接而成的多肽.由于它具有抑菌谱广、安全性能高、热稳定性好等优点,使它成为了目前最具潜力的生物防腐剂.ε-PL已在美国、日本和韩国等地被广泛使用,而我国也已经逐渐把ε-PL作为食品添加剂使用.此外,ε-PL还可用作基因载体、可降解性材料和高吸水材料等.因此,ε-PL具有广阔的应用前景.
本实验通过正交试验方法对ε-PL的发酵培养基进行了优化,提高了发酵产量,为今后的研究提供一些依据.
材料和方法
材料和仪器.白色链霉菌（Streptomyces albulus）F -5,本实验室诱变筛选保藏； 橙、酵母粉、葡萄糖、硫酸铵、MgSO4 ·7H2O、K2HPO4 、KH2PO4（分析纯）,购于国药集团化学试剂有限公司；蛋白胨（化学纯）,购于阿拉丁试剂（上海）有限公司.
紫外-可见光分光光度计（UV-2450 ）,日本岛津企业管理（中国）有限公司；灭菌烘箱（UNE500）,德国MEMMERT公司；超净台（SW-CJ-2FD）,苏州净化设备有限公司；摇床（TS-2102）,上海天呈科技有限公司；实验室常规仪器.
实验方法.
（1）培养基配制
种子和发酵培养基为（g/L）：葡萄糖（50） 、酵母粉（5）、（NH4）2SO4（10）、MgSO4 ·7H2O（0.5）、K2HPO4（0.8）、KH2PO4（1.36）、FeSO4 ·7H2O（0.03）、ZnSO4·7H2O（0.04）,pH 6.8,121 ℃灭菌 20 min.
（2）培养方法
①种子培养
250 mL锥形瓶中装50 mL种子培养基,接入一环孢子,200 r/mim,30 ℃培养24 h.
②摇瓶发酵培养
250 mL锥形瓶中装50 mL发酵培养基,按10%接种量接入种子液,200 r/mim,30 ℃培养72 h.
（3）指标的测定
ε-PL产量测定方法参照Itzhaki F R方法.
（4）发酵培养基优化
①发酵培养基的单因素实验
本实验选择了葡萄糖、酵母粉和硫酸铵这三种对发酵影响较大的成分,分别考察不同浓度对F -5发酵产ε-PL的影响.其中,选择最佳的葡萄糖浓度时,葡萄糖浓度（g/L）设为20、30、40、50、60,其他同发酵培养基；选择最佳的酵母粉浓度时,酵母粉浓度（g/L）设为2.5、5.0、7.5、10.0、12.5,其他同发酵培养基；选择最佳的硫酸铵浓度时,硫酸铵浓度（g/L）设为4、6、8、10、12,其他同发酵培养基.
②发酵培养基优化的正交实验
根据单因素的试验结果,选用葡萄糖、酵母粉及硫酸铵为考察因素,采用正交试验方法,设计三因素三水平的正交实验,其正交试验设计表见表1.
（5）数据处理方法 所有实验做3个平行,Excel进行实验数据误差分析.
结果和分析
葡萄糖浓度对ε-PL产量的影响.实验表明,当葡萄糖浓度低于40 g/L时,ε-PL产量不断增加,并达到最大的1.503 g/L,继续加大葡萄糖的浓度,ε-PL产量反而降低,这可能是由于过多的葡萄糖容易在发酵过程中引起“葡萄糖效应”,从而影响菌体生长和代谢产物的形成.所以本实验选择最佳的葡萄糖浓度为40 g/L.
酵母粉浓度对ε-PL产量的影响.实验表明,随酵母粉浓度的增加,ε-PL产量也随之增加； 当酵母粉浓度达到7.5 g/L时,ε-PL产量达到最大的1.552 g/L； 而继续加大酵母粉浓度时,ε-PL产量开始下降,这可能是由于酵母粉成分复杂,后期底物消耗不完,会诱导产生一些酶降解白色链霉菌菌丝体,故在本实验的考察范围内酵母粉的最佳浓度为7.5 g/L.
硫酸铵浓度对ε-PL产量的影响.实验表明,当硫酸铵浓度为6 g/L时,ε-PL产量达到最大的1.514 g/L,当继续加大硫酸铵浓度时,ε-PL產量开始降低,这说明太多的硫酸铵并不利于ε-PL的形成,因此,确定硫酸铵的最佳浓度为6 g/L.
正交实验确定各培养基成分用量.根据单因素实验的结果,采用正交试验对葡萄糖、酵母粉、硫酸铵进行优化,实验结果如表1所示.
由表1可知,对ε-PL产量的影响排序为：葡萄糖>酵母粉>硫酸铵.最后选择的最优组合为：葡萄糖35g/L、酵母粉7.5g/L、硫酸铵6g/L,在此条件下,F -5的ε-PL产量达1.853 g/L,比优化前的产量提高了19.4%.
通过本实验,对ε-PL的培养基进行了优化,优化后的培养基组分为（g/L）：葡萄糖（35）、酵母粉（7.5）、（NH4）2SO4（6）、MgSO4 ·7H2O（0.5）、K2HPO4（0.8）、KH2PO4 （1.36）、FeSO4·7H2O（0.03）、ZnSO4·7H2O （0.04）,在此条件下,F -5的ε-PL产量达1.853 g/L,比优化前的产量提高了19.4%.今后将在5 L发酵罐上采用此优化培养基进行发酵工艺的研究,以期进一步提高发酵产量,为ε-PL的工业化生产提供一定依据.
基金项目：江苏省高校自然科学研究面上项目（16KJD55002）.
结论：关于本文可作为相关专业食品添加剂论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文食品添加剂检测标准论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。
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