不同激素浓度对食用菊花组织培养影响,该文是关于组织培养论文范文，为你的论文写作提供相关论文资料参考。
组织培养论文参考文献：
摘 要：以盆栽食用菊花的茎尖为外植体,通过调节激素浓度诱导愈伤形成、芽体萌发、继代增殖以及生根壮苗,快速扩繁食用菊花组培苗.研究结果表明：愈伤分化和芽诱导的最适培养基为MS+ 1 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,芽的诱导率可达到55%；不定芽增殖的最适培养基为MS+ 1 mg/L 6-BA+ 0.3 mg/L NAA+ 0.1 mg/L KT,平均每株芽数4.9个；生根的最适培养基为1/2MS+ 0.1 mg/L NAA,根数最多可达11根.
关键词：食用菊花；激素；组织培养
中图分类号：S682.1＋1文献标志码：A论文编号：2013-0921
0引言
菊花为菊科菊属多年生宿根花卉,食用菊花为菊属中味甘芳香的栽培种,含有多种氨基酸、维生素、微量元素及菊花甙、胆碱、腺嘌呤等有效成分[1].菊花在中国栽培历史悠久,以扦插繁殖为主,但是这种繁殖方式系数低、速度慢,受外界环境条件影响严重,不能满足当前市场的需求[2].而利用组织培养技术,不仅可对品种进行脱毒复壮、保持其优良性状,而且能在较短时间里大量扩繁[3].生长素和细胞分裂素是植物组织培养中比较常用的激素,这2类激素的协同调控在组织培养中起着重要作用[4].裘文达[5]从1982年开始,对菊花组织培养技术进行了研究.近年来组织培养成为菊花快繁的主要技术[6-10],但是不同培养基中激素的最佳浓度配比仍有待进一步探讨.因此,本试验拟在前人研究基础上,进一步优化激素浓度配比,提高菊花快繁效率.笔者以食用菊花幼嫩茎尖为研究材料,通过调节培养基中生长素(NAA、IBA)和细胞分裂素(6-BA、KT)的浓度比例,筛选各生长阶段适宜激素浓度,旨在为菊花的组培快繁提供参考.
1 材料和方法
1.1试验时间、地点
研究田间试验于2012、2013年在天津武清试验基地进行,室内试验在本研究中心植物组培室进行.
1.2试验材料
供试菊花为本 种植的盆栽食用菊花,选用其中生长状况良好的幼嫩茎尖为试材.
1.3试验方法
1.3.1无菌材料的获得剪取菊花幼嫩茎尖,用自来水冲洗干净,在超净工作台内用70%酒精表面消毒10~20 s后,用0.8%次氯酸钠处理10 min,并不时摇动,然后用无菌水冲洗3次,以彻底冲洗掉消毒液,剪成1 cm长带侧芽原基的茎段,接种到1/2MS培养基中,即得到无菌外植体.
1.3.2组织培养分别以MS和1/2MS为基本培养基,其中含25 g/L蔗糖、7.5 g/L琼脂粉,添加不同浓度的6-BA、NAA、KT和IBA,pH调至5.8.试验材料培养条件为：温度(25±2)℃左右,每天光照时间14 h,光照强度1500~2000 lx.不同激素浓度对愈伤、萌芽、继代培养以及根诱导试验各设5个处理,每处理接种10瓶,每瓶接种20个外植体,每隔3天观察记录1次,培养40天后统计数据.
2结果和分析
2.1不同激素配比对愈伤及萌芽诱导的影响
无菌材料在1/2MS培养基中培养15~20天后,剔除污染的材料.然后取无菌苗,以MS为基本培养基,将剪取的茎段分别接种在5种不同激素配比的培养基中.其愈伤及不定芽的诱导结果如表1所示.经过一周的培养,1、2号培养基中长出愈伤组织,其中2号培养基中愈伤组织生长较快.
分化愈伤组织的外植体再经过1周左右的培养,腋芽和不定芽渐渐长出,且逐渐转变为绿色,不定芽的诱导时间为20~40天.从表1可以看出,2号培养基中芽的诱导率最高,达到55%,说明本试验中MS+ 1 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA的激素浓度配比是食用菊花愈伤分化和芽诱导的最适培养基.
2.2不同激素浓度对增殖快繁的影响
当不定芽长至1.0 cm左右时,切取新芽转入不同激素配比的增殖培养基中进行增殖培养.40天后,统计其有效芽数,具体结果见表2.
观察统计结果表明：MS+1 mg/L 6-BA+ 0.3 mg/L NAA+ 0.1 mg/L KT的激素组合最适于不定芽增殖,平均每株芽数4.9个,芽的平均长度0.6 cm.可见,在培养基中,加入适当浓度的激素组合,有利于菊花不定芽的增殖.低浓度的KT,可以促进细胞分裂和不定芽分化,有利于芽的增殖.相对于愈伤组织繁殖的方式,芽增殖更有利于保持遗传的稳定性.重复利用增殖培养基B进行培养,扩繁到一定数量后,选取带有4个节的瓶苗,在增殖培养基中微扦插,即能达到快速繁殖菊花组培苗的目的.
2.3生根壮苗阶段
将1~2 cm高的幼苗分别转入1/2MS+ 0.1 mg/L IBA、1/2MS+ 0.5 mg/L IBA、1/2MS+0.1 mg/L NAA、1/2MS+ 0.5 mg/L NAA培养基中.5~10天形成根的突起,15天的生根率均达90%以上,平均根数可达8根以上.从试验结果可以看出,在同一质量浓度下,NAA对根的诱导效果较好,根数最多可达11根,其中 1/2MS+ 0.1 mg/L NAA对根的诱导效果最好,外植体生长状态最好.
3结论
在菊花的组织培养过程中,生长素浓度较低,有利于根的生长和愈伤分化；而浓度较高有利于愈伤的形成.细胞分裂素可以催进愈伤分化,但对根的生长有抑制作用.两者同时使用时,细胞分裂素的比列较高有利于芽分化；生长素浓度较低、比例较高促进根的生长[11-12].适宜的激素组合对菊花的组织培养及快繁有促进作用.
笔者研究发现,生长素和细胞分裂素的比例和绝对含量不同,对菊花各生长时期的影响不同.同时,外界环境条件对组培结果也有影响,情况比较复杂.因此,必须根据菊花生长的不同阶段,针对不同的培养目标,反复进行激素浓度试验,才能取得较好的效果.
4讨论
激素是植物生长的重要调节因子.已有的研究结果表明,在菊花的愈伤及芽诱导阶段,一般采用6-BA和NAA的激素组合诱导愈伤组织[13-14].刘军等[13]以菊花叶片为材料,筛选出愈伤组织诱导的最适培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L；郑杰等[14]以万寿菊为材料,筛选出适合诱导愈伤组织的培养基为MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L,适合愈伤组织分化不定芽的培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L；而本研究认为,MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L是愈伤诱导及芽分化的最适培养基.由此可见,不同菊花品种对6-BA和NAA浓度需求存在差异,应根据具体品种确定最适浓度.
在芽增殖阶段,细胞分裂素6-BA的含量不宜超过1.0 mg/L[10,15],如果含量过高,会导致芽变粗并且不能形成正常的增殖芽；NAA含量不宜过高[10,16],过高会影响芽分化且使分化出的苗细长不适合以后的壮苗和练苗,本研究结果和前人研究结果相似.
在生根壮苗阶段,本研究认为1/2MS+ 0.1 mg/L NAA是生根的最适培养基,该结果和汪晓沙[10]、建德锋[17]和周洲[18]等的研究结果相同,而和李秋杰[19]和丁世民[20]等的研究结果不同.这可能和他们分别以叶片、花蕾为外植体有关,而在本研究中使用的外植体为菊花茎尖.因此,适宜激素浓度和种类的不同,可能和试验菊花品种及取材部位有关.
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